کلونینگ و بیان ژن vp3 ویروس بیماری بورس عفونی جهت طراحی و ارزیابی آزمایش الیزا
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی
- نویسنده علی محبت
- استاد راهنما مسعود قربانپور نجف¬آبادی مسعود رضا صیفی¬آباد شاپوری منصور میاحی مهدی مهدی پورمهدی بروجنی
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1393
چکیده
ویروس بیماری بورس عفونی، vp3، کلونینگ، الیزا بیماری بورس عفونی، یکی از بیماری¬های بسیار واگیر طیور است که در صنعت طیور در سراسر جهان باعث زیان¬های اقتصادی می¬شود. پس از عفونت با ویروس اولین آنتی¬بادی¬ها بر ضد vp3 ظاهر می-شود، بنابراین پروتئین نوترکیب vp3 می تواند آنتی¬ژن مطلوبی برای استفاده در الیزا ¬باشد. در این مطالعه ژن vp3 ویروس بیماری بورس عفونی با استفاده ازآزمایش rt-pcr تکثیر داده شد و سپس با استفاده از پلاسمید پروکاریوتی بیانی pmal-c2x در e.coli کلون گردید. بیان پروتئین vp3 در آزمایشات sds-page و وسترن بلاتینگ بررسی ¬شد و سپس برای تایید نهائی سکانس ژن کلون شده مورد ارزیابی قرار گرفت. در ادامه پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون کروماتوگرافی حاوی رزین آمیلوز خالص ¬گردید و برای پوشش دادن حفرات پلیت الایزا استفاده شد. با بهینه سازی، پارامترهای مهم این آزمایش شامل میزان آنتی¬ژن در هر حفره و رقت سرم¬های آزمایشی، نوع بلوک کننده و در آخر رقت مناسب کنژوگه تعیین ¬گردید. پس از این مرحله عملکرد آزمایش طراحی شده با انجام آزمایش بر روی 226 سرم تهیه شده بررسی¬ شد. در پایان میزان همبستگی نتایج آزمایش طراحی شده با نتایج بدست آمده از آزمون خنثی سازی و کیت الایزای تجاری آیدکس گامبورو تعیین گشت. آزمون مک نمار و آماره کاپا مشخص کرد که میزان همبستگی بالایی بین نتایج الایزای vp3، آزمایش خنثی سازی ویروس و الایزای تجاری وجود دارد. این یافته¬ها حاکی از آن بود که الایزای طراحی شده با vp3، آزمایشی حساس و اختصاصی است و می¬تواند جهت ساخت یک کیت الایزای تجاری مورد استفاده قرار گیرد.
منابع مشابه
بررسی بیان موقت ژن VP2 ویروس بسیار حاد بیماری بورس عفونی در برگ توتون، یونجه و کاهو به روش آگرواینفیلتراسیون
پروتئین VP2 ایمونوژن اصلی محافظت‌کننده جوجه‌ها در برابر ویروس بیماری بورس عفونی است و با توجه به اهمیت و مقبولیت فناوری جدید تولید پروتئین‌های نوترکیب شامل واکسن‌ها، پادتن‌ها و داروها درگیاهان، تولید پروتئین نوترکیب VP2 بسیار مورد توجه قرار دارد. در این تحقیق از بیان موقت ژن VP2 به روش آگرواینفیلتراسیون یا انتقال ژن تحت خلاء توسط آگروباکتریوم، برای تولید این پروتئین نوترکیب درگیاهان توتون، یونج...
متن کاملمطالعه عفونت تجربی ویروس بیماری نیوکاسل در جوجه‌های مادر بومی متعاقب آلودگی ویروس بیماری بورس عفونی
نشانه‌های بالینی، جراحات ماکروسکوپی، گسترش ویروس در بافت‌ها و انتشار در محیط و پاسخ ایمنی هومورال به ویروس حاد نیوکاسل در جوجه‌های مادر بومی متعافب آلودگی به ویروس گامبورو مورد بررسی قرارگرفت. یک‌صد و بیست جوجه‌ی مادر بومی یک روزه به‌طور تصادفی به چهار گروه مساوی تقسیم شدند. جوجه‌های گروه اول و دوم در سن یک‌روزگی به ویروس بیماری بورس عفونی با دوزCID50 103 به داخل بورس تلقیح شدند. جوجه‌های گروه...
متن کاملبررسی بیان موقت ژن vp2 ویروس بسیار حاد بیماری بورس عفونی در برگ توتون، یونجه و کاهو به روش آگرواینفیلتراسیون
پروتئین vp2 ایمونوژن اصلی محافظت کننده جوجه ها در برابر ویروس بیماری بورس عفونی است و با توجه به اهمیت و مقبولیت فناوری جدید تولید پروتئین های نوترکیب شامل واکسن ها، پادتن ها و داروها درگیاهان، تولید پروتئین نوترکیب vp2 بسیار مورد توجه قرار دارد. در این تحقیق از بیان موقت ژن vp2 به روش آگرواینفیلتراسیون یا انتقال ژن تحت خلاء توسط آگروباکتریوم، برای تولید این پروتئین نوترکیب درگیاهان توتون، یونج...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان وکتور نوترکیب ژن نوکلئوپروتیین ویروس هاری
Background: Rabies is an acute encephalitis that causes more than 60,000 deaths worldwide. The only way to save individuals bitten by a rabies-infected animal is the timely use of effective vaccines. Treatment with new generation vaccines is expensive. Therefore, there is a global movement towards the production of less expensive vaccines which retain and improve upon the quality and effectiven...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023